Ⅲ. 直接免疫蛍光法 (ヒト全血)
(2)OptiLyse B -B.D.社フローサイトメーター用溶血試薬(No-wash)
サンプル処理 1~5カラー解析(FITC/PE/ECD/PC5/PC7)
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1. 準備 測定する患者検体ごとに試験管(12×75mm)を測定項目数+1本用意し、1本にコントロール、残りに抗体名をラベルします。 |
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2.抗体の添加*1 抗体名をラベルした試験管に各抗体を規定量*1加えます。コントロールの試験管には、調べたい抗体に対応するアイソタイプコントロールを加えます。 |
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3. 検体の添加*2 ヒト全血100μL*2を加え、よく攪拌します。 |
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4. インキュベーション 室温(20~25℃)、暗所で10~15分インキュベーションします。 |
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5. 溶血剤の添加 OptiLyse Bを100μL加え、 よく攪拌します。 |
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6. インキュベーション 室温(20~25℃)、暗所で10分インキュベーションします。 |
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7. 蒸留水の添加 蒸留水を1mL加え、 よく攪拌します。 |
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8. インキュベーション 室温(20~25℃)、暗所で10分インキュベーションします。 |
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9. 洗浄 そのまま、測定します。 溶血終了後は、測定まで2~8℃で遮光保存してください。 24時間以内に測定してください。 |