フローサイトメトリー入門
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細胞表面抗原密度と細胞質内イオン濃度
Cell Lab Quanta SC/Quanta SC MPLを用いて、 独自の新しいパラメーターであるFC ：Fluorescence concentration(蛍光強度を細胞容積で割ったパラメーター)と FSD ：Fluorescence Surface Density（蛍光強度を細胞表面積で割ったパラメーター）で測定しました。 Jurkat 細胞を、赤色蛍光標識Annexin V（細胞表面にあるPhosphatidyl Serineによるアポトーシス検出：赤色蛍光）とPBFI （細胞質内のKイオンインディケーター：緑色蛍光）で染色しました。UVを照射し、アポトーシスを誘導後、緑色蛍光のFC（Kイオン濃度：FL1-FC）と、赤色蛍光のFSD（PSの表面密度：FL2-FSD）を測定（左図）。右側のデータは、従来の2カラー解析データ FL2 vs FL1 です。
従来のデータ（右図）では、アポトーシスによる細胞の大きさの変化により、見かけ上、各蛍光強度が低下する誤差が含まれていましたが、FCとFSDを用いることにより、これらの誤差を最小化し、定量化することができます。
FC（単位容積あたりの蛍光強度）
FSD（単位表面積あたりの蛍光強度）
FSD（単位表面積あたりの蛍光強度）
FL1 FC = K+-PBFI, 細胞質内密度（カリウムイオン濃度）
FL2 FSD = Annexin V, 表面膜抗原密度（アネキシンＶ表面密度）
