3.　生細胞や生菌などの濃度（個/mL）が簡単に測れること

フローサイトメーターは、サンプル中の目的の細胞や細菌、酵母の濃度（個/mL）を、2種類の方法で測定することができます。現在、フローサイトメーターのサンプル供給の方式は2種類あり、それにより、濃度測定法が異なります。

加圧吸引方式　：

サンプルが入っているチューブを、ふたをして加圧し、圧の低いノズルからサンプルが吸引され、フローセルに供給される

シリンジ方式　：

シリンジポンプを用いて、チューブから一定量のサンプルを吸引し、装置内に一旦貯え、シリンジポンプにより押し出され、フローセルに供給される

加圧吸引方式のフローサイトメーターは、内部標準法により、細胞濃度（個/mL）を測定することができます。内部標準物質となる濃度既知のビーズ液を、サンプルに対して一定の割合で添加し、そのビーズ数との比で、目的細胞の濃度（個/mL）を求めることができます。便利な自動計算プログラムが内蔵されている機種があります。
加圧吸引方式はサンプル量を連続的に多量吸引できるので、希少細胞の検出感度を向上させることが容易です。

図7．内部標準法　残存白血球数測定

シリンジ吸引方式のフローサイトメーターは、サンプルの一定量(例えば、100μＬ)を正確に吸引することができるので、フローサイトメーターの標準ソフトウエアで自動換算して、細胞濃度（個/mL）を表示することができます。内部標準物質の添加は不要で、測定が容易です。

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まとめ

セルバイオロジーでは、多くの抗体を同時に用いる表面マーカー解析のような、多くの蛍光を同時に測定するマルチカラー検出系は必要ありません。３カラーで十分でしょう。むしろ、高い蛍光分解能、UV光励起、細胞体積測定、シリンジ吸引方式が、これからは必須の機能になります。これらを装備するハイレゾリューションフローサイトメーターの登場により、細胞周期、アポトーシス、細胞機能、生死判定などのアプリケーションは、さらに高い次元に到達できるでしょう。

1. 細胞周期解析では、UV励起のDAPI蛍光色素が使え、CV値が良いこと
2. アポトーシス解析では、細胞の大きさの変化を、コールター原理により定量化できること
3. シリンジ方式により、生細胞や生菌などの濃度（個/mL）が容易に測れること