1. はじめに

【1】

悪性リンパ腫について（FCMの情報の重要性は年々増大している）

【2】

血液検査室における悪性リンパ腫（血液検査技師よ、苦手意識を振り払え）

【3】

フローサイトメトリーにおける悪性リンパ腫（腫瘍性の判定と性状を決定する）

【4】

フローサイトメトリーと関連検査（FCMは検査の司令塔、検索の方向性を示せ）

1. 操作方法

【1】

組織材料の取り扱い（組織は一期一会，細胞は生ものお早めに）

• 1）組織の分割（挫滅に気を付け、捺印標本を作成）
• 2）浮遊細胞の調整（十分量は1×10⁷個の細胞）

【2】

細胞像の観察（マーカー検査の基本）

【3】

免疫染色（抗体クローンの選択と濃度検定は、Cytometristの仕事）

 

• 1）免疫染色法（抗体濃度の基本は、10～500ng/test）
• 2）1次スクリーニング（2重染色が安価で解析も容易である）
• 3）追加検査

【4】

DNA量の測定（方法の選択はCVが良好なもの）

• 1）PI染色法（簡便・低コストで貴重な情報を提供）
• 2）PIとマーカーとの2重染色（まずはPIで単染色、必要に応じ2重染色）
• 3）DNA量測定のための細胞保存（手軽で短期的な細胞保存が可能）

1. 解析方法

【1】

解析領域（標本のイメージを散乱光サイトグラムで確認）

【2】

B細胞のクロナリティー検索（surface Igκ/λ比で約9割判明）

 

• 1）CD19,20,21,22,23の系統抗原について
• 2）細胞表面Ig(sIg)について
• 3）CD10について
• 4）CD5について
• 5）CD11cについて
• 6）CD38について
• 7）CD56について
• 8）CD138について
• 9）CD30について
• 10）CD13,33等の骨髄系抗原について
• 11）その他

【3】

T/NK細胞のクロナリティー検索（CD4/8比では、腫瘍性は不明）

 

• 1）CD2,3,5,7の系統抗原について
• 2）CD4,8について
• 3）CD25,28,122,HLA-DRなどの活性化抗原について
• 4）CD10について
• 5）CD30について
• 6）CD56について
• 7）TDR-Vβレパトア解析について

【4】

DNA量測定の意義（DNA aneuploidyで腫瘍性の判断と割合を知る）

1. 細胞保存と関連検査の準備（余分な細胞は保存する）
2. おわりに
3. 悪性リンパ腫　症例集

著者　天理よろづ相談所医学研究所　林田 雅彦先生