Cytospin標本の作製と染色

1．サンプルチャンバーのセット

濾紙の裏面（穴の平らな方）をガラス側とし、密着させる。
その上にサンプルチャンバーを濾紙の穴に重ならない様に中央にセットする。

2．細胞液の調整

細胞液の調整には、細胞数や蛋白濃度に気を付ける。

1）

細胞数

細胞の大きさにより異なるが、比重遠心分離後で赤血球をほとんど含まない場合
  ・リンパ球位の大きさ：約2～3ｘ106/ml
  ・顆粒球などやや大型細胞：約1～2ｘ106/ml
（RBCの混入程度により適宜細胞数を調整する）

2）

蛋白濃度（細胞破壊を防ぐ）

アルブミンを終濃度0.1～1.0%に保つ。細胞数が少ない場合は特に蛋白が必要である。 赤血球が多い時は，アルブミンは少なくて良い。

3．遠心による標本作製

1）

細胞液量：70～100μL

2）

遠心条件：600～800rpm、2～3分

4．ライト染色

1）

標本の乾燥

遠心後，直ちに標本を風乾する、（風乾は数秒で十分であるが，赤血球混入時はやや長めにする）

2）

染色

メルクのライト液を2ml載せ、直ちに1/150Ｍ・pH6.4リン酸緩衝液を2ml追加して混和する。4～5分で水洗し、乾燥する。
（赤血球の混入程度により、 5～8分と適宜調整する）

※ ライト染色は顆粒，核の染色が短時間で可能である。