• 2カラーフローサイトメーター用 フロービーズアレイ試薬キット
• 対象サンプル・対応機種
• Multiplex Kit
• Simplex Kit
• 原理と測定手順
• Simplex組み合わせ表
• 測定データ・測定範囲・ELISAとの相関データ
• 仕様・ビーズプロット位置
• 参考例

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2カラーフローサイトメーター用 フロービーズアレイ試薬キット（研究用）

種々の疾病や炎症、免疫応答などに伴う生体反応を調べる研究では、様々な生物学的パラメータの変動や相関を調べることが重要です。
フロービーズアレイ解析は、複数の可溶性成分を、一般的なシングルレーザ（488nm） 2カラーフローサイトメーターで同時に定量できる測定技術です。1キットで1種類の成分しか測定できないELISA法と比べて、多項目のサイトカイン、ケモカイン等を測定する実験系においては、非常に経済的な高効率測定技術です。

25µLで可溶性成分を20項目定量測定

FlowCytomixは、わずか25μLのサンプル量で最大20項目までの可溶性成分の相関を、1回の測定で得ることのできる定量測定技術です。ELISA法と相関のあるデータを得ることができます。

FlowCytomix独自のビーズテクノロジー

FlowCytomixは、大きさと濃赤色蛍光強度の異なる20種類のビーズ〔大きさ2種類×濃赤色蛍光強度（11＋9段階）〕それぞれに異なる可溶性成分を検出する抗体が結合させてあり、これらのビーズ上でサンドイッチ法によるイムノアッセイを行います。蛍光は、ビーズ同定用の濃赤色蛍光と、抗体定量用のPEの赤橙色蛍光を同時測定します。共に、488nmのレーザで励起できます。

専用解析ソフトFlowCytomixPro

FlowCytomixには、専用解析ソフトウエア（FlowCytomixProソフトウエア）が添付され、検量線作成、サンプル定量解析がウイザードに従って簡単にできます。解析結果は、CSＶフォーマットやPDFで出力することができます。ソフトウエアはWindows、Macintoshに対応しています。

経済的なMultiplexKit，自由な組み合わせのSimplexKit

MultiplexKitは、免疫応答に関与したサイトカインや心臓疾患に関与したサイトカインの研究に適したビーズを組み合わせたキットです。MultiplexKitには必要な試薬、ソフトウエアがすべて含まれています。
Simplex Kitは、組み合わせ自由なビーズです。研究にあわせてSimplex Kitを組み合わせて使用することができます。

対象サンプル	対応機種
血清 血漿 培養上清 全血 その他体液　（滑液、髄液など）	Cytomics FC 500 EPICS XL ： 専用FSフィルタ （製品番号 772298、価格　\10,000）が必要です。 その他のEPICSシリーズ ： お問い合わせください BD社製フローサイトメーター ： FACSCalibur、FACScan

FlowCytomixフロービーズアレイキット　Multiplex Kit

各抗体標識蛍光ビーズ（37種類）も単品で発売予定ですので、自由に組み合わせて測定することができます。

製品番号（価格）	製品名（容量96テスト：　8検量線×2テスト）
BMS810 （\250,000）	ヒトTh1/Th2サイトカインキット 11plex 11項目同時 IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70、TNF-α, TNF-β
BMS811 （\175,000）	ヒトCardiovascularキット　7plex 7項目同時 sCD40L, IL-6, IL-8, MCP-1, sP-selectin, t-PA, sVCAM-1
BMS812 （\150,000）	ヒトAdhesionキット　6plex 6項目同時 sE-selectin, sICAM-1, sICAM-3,sPECAM-1, sP-selectin, sVCAM-1
BMS820 （\250,000）	マウスTh1/Th2サイトカインキット 10plex 10項目同時 GM-CSF, IFN-γ, IL-1α, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17, TNF-α

フロービーズアレイ用定量解析ソフトウェア
Flow Cytomix 1.0
1,570KB

キット内容
Capture用抗体コーティング蛍光ビーズ 試薬希釈用バッファ アッセイバッファ 検量線用標準タンパク（2回分） ビオチン標識抗体（AdhesionキットはPE標識抗体です） PE標識ストレプトアビジン（Adhesionキットには含まれません） フィルタプレート プレートカバー 定量解析ソフトウエア　FlowCytomixPro CD-ROM版 機器設定用セットアップビーズ

FlowCytomixフロービーズアレイキット　Simplex Kit

ヒトサイトカイン　ビオチン標識 容量96テスト（各￥33,500／キット）
製品番号	製品名	感度 （pg/mL）	測定範囲 （pg/mL）	ﾌﾟﾛｯﾄ位置
BMS8239	sCD40L	50.0	40,000 - 55	A3
BMS8228	IFN-γ	2.2	20,000 - 27	A4
BMS8224	IL-1β	5.2	20,000 - 27	B8
BMS8221	IL-2	20.0	20,000 - 27	A6
BMS8225	IL-4	15.7	20,000 - 27	B6
BMS8278	IL-5	10.0	20,000 - 27	B7
BMS8213	IL-6	0.8	20,000 - 27	A12
BMS8204	IL-8	7.9	10,000 - 14	A10
BMS8215	IL-10	1.5	20,000 - 27	A8
BMS8238	IL-12p70	11.6	20,000 - 27	A2
BMS8281	MCP-1	11.0	30,000 - 41	A7
BMS8223	TNF-α	17.5	20,000 - 27	B9
BMS8202	TNF-β	3.1	20,000 - 27	B10
BMS8258	t-PA	8.0	20,000 - 27	A5

マウスサイトカイン 容量96テスト（各￥30,000／キット）
製品番号	製品名	感度 （pg/mL）	測定範囲 （pg/mL）	ﾌﾟﾛｯﾄ位置
BMS8612	GM-CSF	16.9	20.000 - 27	B8
BMS8606	IFN-γ	4.0	20.000 - 27	B6
BMS8611	IL-1α	19.7	20.000 - 27	A4
BMS8601	IL-2	7.5	20.000 - 27	A6
BMS8613	IL-4	7.3	20.000 - 27	B9
BMS8610	IL-5	4.1	20.000 - 27	A8
BMS8603	IL-6	0.9	20.000 - 27	A10
BMS8614	IL-10	13.4	20.000 - 27	A12
BMS86001	IL-17	2.8	20.000 - 27	B10
BMS8607	TNF-α	8.6	20.000 - 27	B7

ヒトサイトカイン　PE標識 容量96テスト（各￥33,500／キット）
製品番号	製品名	感度 （pg/mL）	測定範囲 （pg/mL）	ﾌﾟﾛｯﾄ位置
BMS8205	sE-Selectin	2.9	3,000 - 4	A9
BMS8201	sICAM-1	8.1	4,000 - 5	A11
BMS8218	sICAM-3	0.5	8,000 - 11	A7
BMS8219	sPECAM-1	1.3	3,000 - 4	A5
BMS8229	sP-Selectin	0.1	14,000 - 19	B4
BMS8232	VCAM-1	0.5	4,000 - 6	B5

Simplex Kit使用の場合、下記のBasic Kitが別途必要となります。

製品番号	製品名　容量96テスト	価格
BMS8420	Human Basic Kit　 （ビオチン標識用）	￥35,000
BMS8421	Human Basic Kit（Adhesion）　 （PE標識用）	￥35,000
BMS8440	Mouse Basic Kit	￥30,000

ヒト用Simplex Kitビオチン標識とPE標識を組み合わせて使用 される場合は、製品番号BMS8420　Human Basic Kit （ビオチン標識用）をご使用ください。

FlowCytomixフロービーズアレイキットの原理と測定手順

1	ビーズ上でサンドイッチ法によるイムノアッセイを行います。 大きさと濃赤色蛍光強度の異なる20種類までのビーズ（大きさ2段階×濃赤色蛍光強度10段階）を組み合わせます。* * 組み合わせ可能なビーズは、組み合わせ表でご確認ください。
2	種々の抗体を結合したビーズの混合液に、サンプルまたは 標準液（7濃度）を25µL加えます。 サンプルまたは標準液中の各測定対象物質が対応するビーズに結合します。
3	ビオチン標識抗体を加えます。* 未反応の抗体をバッファで洗浄します（2回）。 * BMS812はPE標識抗体です。
4	PE標識ストレプトアビジンを加えます。* バッファで洗浄し、500μLに再浮遊します。 * BMS812は不要です。
5	488nm励起のフローサイトメーターでFS,SS,PE蛍光,濃赤色蛍光(690nm)を測定します。* 散乱光と濃赤色蛍光でビーズを識別し、各々のビーズのPE蛍光強度から各測定対象物質の濃度がわかります。 * EPICS XL/XL-MCLの場合、専用FSフィルタ（製品番号772298）が必要です。 * 別途設置費用が必要です。
6	キットに添付されている定量解析ソフトウエアFlowCytomixProを用いて、解析します。

FlowCytomix Simplex組み合わせ表

■：Simplex Kitsで組み合わせ可能 ■：Simplex Kitsで組み合わせ不可（同じビーズプロット位置）
sCD40L（BMS8239）	-
sE-selectin（BMS8205）		-
sICAM-1（BMS8201）			-
sICAM-3 （BMS8218）				-
IFN-γ（BMS8228）					-
IL-1β（BMS8224）						-
IL-2（BMS8221）							-
IL-4（BMS8225）								-
IL-5（BMS8278）									-
IL-6（BMS8213）										-
IL-8（BMS8204）											-
IL-10（BMS8215）												-
IL-12 (p70)（BMS8238）													-
MCP-1（BMS8281）														-
sPECAM-1（BMS8229）															-
sP-selectin（BMS8219）																-
VCAM-1（BMS8232）																	-
TNF-α（BMS8223）																		-
TNF-β（BMS8202）																			-
t-PA（BMS8258）																				-

（　）内は製品番号

参考例