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	■ 樹状細胞サブセット（MDC）　1バイアル3カラー抗体

樹状細胞（Dendritic Cell:DC）は、脳を除く全身の組織に分布する多数の樹状突起を持つ細胞で、T細胞に対して　強い抗原提示能を示す抗原提示細胞（APC）です。生体内における免疫応答で重用な役割を担っており、DCの強い抗原提示能を利用した特異的キラーT細胞の誘導による抗腫瘍免疫やHIV感染症、自己免疫疾患、アレルギーなど、免疫系の関与する様々な疾患への臨床応用に向けた研究が行われています。

DCにはその由来により2つのサブセットが存在することが知られており、それぞれMyeroid Subset(MDC)、Plasmacytoid Subset(PDC)と呼ばれます。CD85k(ILT3)は単球および両系統のDCに発現する　細胞表面マーカーで、既存の表面マーカーと組み合わせることにより、DCを確実に測定することが可能となります。

弊社では、CD85k（ILT3）を中心にしたユニークなゲーティングによりMDCあるいはPDCを測定可能な、3カラーカクテル抗体を販売しております。詳しくは以下をご参照ください。

Dendritic Cells “Myeloid Subset”
Dendritic Cells “Plasmacytoid Subset”

Dendritic Cells “Myeloid Subset”（製品番号：A07405）およびDendritic Cells “Plasmacytoid Subset”　(製品番号：A07412)は、MDCあるいはPDCを測定する最適な抗体を組み合わせたマルチカラー、フローサイトメトリー用試薬です。下図のように、CD33⁺/CD85k（ILT3）⁺またはCD123⁺/CD85k（ILT3）⁺の分画をそれぞれMDCあるいはPDCとして同定します。CD85k（ILT3）は単球にも発現するためCD(14+16)^brightの部分を除外する必要がありますが、この際に行うゲーティングでは好酸球を目印にしています。好酸球を目印にすることで、サンプル中の微量なDCに正確なゲーティングを行うことが可能です。

近年の多くの報告に見られるDCフェノタイプ^1,2,3,4)MDC ： CD14 ^dim-to-neg/CD16^-/CD33⁺/CD85ｋ（ILT3）⁺/ILT1⁺/CD64⁺/CD11c⁺
PDC ： CD14^-/CD16^-/CD33^-/ CD85ｋ（ILT3）⁺/ILT1^-/CD64^-/BDCA-2⁺/CD123⁺/CD11ｃ^-
Monocytes ： CD14 ^{bright-to-dim}/CD16 ^{dim-to-bright}/CD33⁺/CD85ｋ（ILT3）⁺

＜文献＞

1） Thomas, R., and Lipsky, P.E., “Human peripheral blood dendritic cell subsets”, 1994, J. Immunol., 9, 153, 4016-28.

2） Fagnoni, F.F., Oliveiro, B., Zibera, C., Gibelli, N., Lozza, L., Vescovini, R., Sansoni, P., Zambelli, P., DaPrada, G., and Robustelli della Cuna, G.,“Circulating CD33+ large mononuclear cells contain three distinct populations of putative antigen-presenting cells including myeloid dendritic cells and CD14+ monocytes with their CD16+ subset”, 2001, Cytometry, 45, 124-132.

3） Upham, J.W., Lundahl, J., Liang, H., Denburg, J.A., O’Byrne, P.M., and Snider, D.P., “Simplified quantitation of myeloid dendritic cells in peripheral blood using flow cytometry”, 2000, Cytometry, 40, 50-59.

4） Cella, M., Dohring. C., Samaridis, J., Dessing. M., Brockaus, M., Lanzavecchia, A., Colonna, M., “A novel inhibitory receptor(ILT3) expressed on monocytes, macrophages, and dendritic cells involved in antigen processing”, 1997, J. Exp. Med., 185, 1743-1751

CD83　成熟（活性化）樹状細胞マーカー

CD83は分子量45kDaの免疫グロブリンスーパーファミリー糖タンパクです。CD83は樹状細胞系に発現するほか、胚中心リンパ球および活性化リンパ球にも弱く発現します。CD83陽性の樹状細胞は抗原取り込みは弱いものの抗原提示能が非常に強く、機能的に成熟（活性化）した樹上細胞であると考えられます。

＜文献＞
1） L-J. Zhou and T.F. Tedder : Blood vol.86:3295-3301(1995)
2） L-J. Ahou and T.F. Tedder : J. Immunol. Vol.154 : 3821-3835 (1995)

CD206 (Mannose Receptor, MMR)　樹状細胞に強く発現する抗原レセプタ

CD206は175-195kDaのマルチレクチンレセプタファミリー糖タンパクで、病原微生物に広く存在する共通分子構造を認識する、代表的なPRR（パターン認識レセプタ）です。CD206を会するエンドサイトーシスは樹状細胞における外来抗原の捕獲および細胞内濃縮に重要です。樹状細胞における発現強度は、成熟（活性化）に伴って低下します。

＜文献＞
1）   Saullusto F, et al. : J. Exp. Med. Vol.182 : 389-400 (1995)
2）     Engering AJ, et al. : Eur. J. Immunol. Vol.27 : 2714-2425 (1997)
3）     Stahl PD, et al. : Current Opinion in Immunology vol.27 : 2714-2425 (1997)

CD207 (Langerin)　ランゲルハンス細胞（LC）関連マーカー

CD207はランゲルハンス細胞（LC）に発現する40kDaの糖タンパクで、細胞表面と細胞質内の双方に発現します。また、LC特異的なマーカーで　成熟に伴って発現強度が低下すること、MHC classⅡ経路への抗原輸送には関与せず、抗原の捕獲に重要であることが示唆されています。

＜文献＞
1）     J. Valladeau, et al. : Eur. J. Immunol. Vol.29 : 2695-2704 (1999)
2）     T. Ito, et al. : J. Immunol. Vol.163 : 1409-1419 (1999)
3）     D. Bell, et al. : J. Exp. Med. Vol.190 : 1417-1426 (1999)
4）     J. Valladeau, et al. : Immunity vol.12 : 71-81 (2000)

CD208 (DC-LAMP)　抗原プロセッシングと提示に関連した細胞内抗原

CD208はLAMPファミリーに属する分子量70-90kDaのⅠ型膜貫通型タンパクで、多くの糖鎖が付加しています。リンパ組織のT細胞領域に見られる成熟樹状細胞に発現しますが、その90%はリソソーム内腔に存在します。CD86等の成熟マーカーの発現と直接的な相関関係が認められることが明らかにされており、外来性抗原のプロセッシングと提示に重要であることが示唆されています。

＜文献＞
1） B. de Saint-Vis, et al. : Immunity vol.9 : 325-336 (1998)
2） D. Bell, et al. : J. Exp. Med. Vol.190 : 1417-1426 (1999)

CD209 (DC-SIGN)　抗原提示に寄与する膜貫通型タンパク

CD209 (DC-SIGN; DC-Specific ICAM-3- Grabbing Non-integrin)は分子量44kDaのⅡ型膜貫通型タンパクで、糖鎖認識部位（CRD）を　持つC型レクチンです。樹状細胞に強く発現し、T細胞に対する抗原提示において重用な役割を持つと考えられています。また、HIV-1のエンベロープタンパクに結合することから、HIV-1のT細胞への感染を助長している可能性が指摘されています。

＜文献＞
1) S. G. Turvill, et al : Trends in Glycoscience and Glycotechnology vol.14 : 255-271(2002)
2) B. H. Teunis, et al. : Cell vol.100 : 575-585 (2000)

樹状細胞関連抗体

X-11抗体は､最終補体複合体もしくはポリマー化したC9にある新生エピトープを認識します｡末梢血の樹状細胞と反応します。それ以外の血液細胞には存在しません。LPSやIFN-γで刺激した単球もこの抗原を発現しません。

これらの樹状細胞関連抗原のほか、樹状細胞にはCD1、CD11c(インテグリンαX)、CD40、CD58（LFA-3）、CD86、HLA-DRなどのマーカーが発現しており、単球／マクロファージのマーカーであるCD14が陰性です。また、CD85k（ILT3）は樹状細胞と単球/マクロファージ系のみに発現する機能調節分子で、CD14と組み合わせることでLineage Cocktailを用いることなしに樹状細胞をゲーティングできます。

製品名	クローン	アイソタイプ	標識	製品番号
Dendritic Cells "Myeloid Subset" CD（14+16）/CD85k/CD33	RMO52+3G8/ZM3.8/D3HL60	IgG2a+IgG1/IgG1/IgG1	FITC/PE/PC5	A07405
Dendritic Cells "Plasmacytoid Subset" CD（14+16）/CD85k/CD123	RMO52+3G8/ZM3.8/107D2	IgG2a+IgG1/IgG1/IgG1	FITC/PE/PC5	A07412

製品名	ｸﾛｰﾝ	ｱｲｿﾀｲﾌﾟ	精製AF	FITC	PE	ECD	PC5	APC
CD1a	BL6	IgG1	IM0130		IM1942		IM3610	IM3645
	19Thy1A8(T6)	IgG1			6603185^*
CD1c	L161	IgG1	IM0789
CD11c	BU15	IgG1	IM0712		IM1760
CD14	116(Mo2)	IgM		6602507^*6604114^☆	6603266^*6604500^☆
	322A-1(MY4)	IgG2b		6603511 6604110^☆	6603262
	RMO52	IgG2a	IM0463	IM0645^*	IM0650^*	IM2707	IM2640	IM2580
CD40	MAB89	IgG1	IM1374		IM1936
CD58	AICD58	IgG2a	IM0861	IM1218	IM1430		IM3702	IM3701
CD80	MAB104	IgG1	IM1449	IM1853	IM1976
CD83	HB15a	IgG2b	IM2069	IM2410	IM2218		IM3240
CD85j （ILT2）	HP-F1	IgG1			A07408
CD85ｋ（ILT3）	ZM3.8	IgG1					IM3579
CD86	HA5.2B7	IgG2b	IM2728		IM2729
CD206（MMR）	3.29B1.10	IgG1			IM2741
CD207 （Langerin）	DCGM4	IgG1	IM3449		IM3577
CD208 （DC-LAMP）	104.G4	IgG1	IM3448		IM3578
CD209 （DC-SIGN）	AZN1	IgG1	A07406		A07407
Dendritic Cells	X-11	IgG1	IM1110
HLA-DR	B8.12.2	IgG2b	IM0108	IM0463^*	IM0464^*
HLA-DR	Immu-357	IgG1		IM1638	IM1639	IM3636	IM2659	IM3635
HLA-DR,DP,DQ	9-49 (I3)	IgG2a		6603424^*	6603450 6604366^☆

＊：体外診断用医薬品　　　精製AF＝防腐剤不含精製抗体（0.2mg/vial）　　☆：CYTO-STAT仕様（50テスト用，No-Wash法対応）

VersaLyse溶血試薬
製品番号	容量	定価
IM3648	100テスト	\7,800

VersaLyseは未洗浄法に対応した溶血試薬です。塩化アンモニウムのように溶血過程でNH₄⁺を生成しないため、細胞浮遊液のpH変化が少なく、細胞に与えるダメージを最小に抑えることができます。
IOTest 3 固定試薬（IM3514）と組み合わせて、ワンステップでの溶血固定も可能です。

■ 樹状細胞サブセット（MDC） 1バイアル3カラー抗体

FITC

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