HOME → Allergenicityキット 細胞機能に基づくアレルギー試験
10月20日～22日に岩手県盛岡市で行われます第55回日本アレルギー学会秋季学術大会において、好塩基球の活性化を指標とするアレルギー試験キットAllergenicityキットを用いたスギ花粉症の解析データを、国立病院機構 三重病院 臨床研究部 長尾みづほ先生にご発表いただきました。
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好塩基球のアレルゲン反応性をフローサイトメトリーで評価！
Allergenicity Kitは、好塩基球の特異的マーカーであるCD203cの細胞表面における発現強度が、好塩基球の活性化に伴って増強することを利用する、細胞機能に着目した革新的なアレルギー試験の試薬キット（研究用）です。
今回、国立病院機構 三重病院 臨床研究部 長尾みづほ先生、徳田玲子先生、野間雪子先生、藤澤隆夫先生にキットをご使用いただき、アレルギー学会にて、スギ花粉症のデータを発表いただくことになりました。さらに11月の小児アレルギー学会においては、食物抗原に関して発表されるご予定です。
アレルギー学会ご発表要旨
Allergenicity Kitによる末梢血測定例 |
| （データ提供：（独）国立病院機構 三重病院 臨床研究部 長尾みづほ先生、徳田玲子先生、野間雪子先生、藤澤隆夫先生）
Allergenicity Kitは、即時型アレルギー反応をin vivoに近い形で、かつ簡便に評価できる新しいキットと考えられます。私たちはスギ花粉症において、抗原特異的に好塩基球表面におけるCD203cの発現が増強することを確認しました（下図）。この発現増強の程度（MFI値の変化）は重症度とよく相関する可能性もあり、現在検討中です。  スギ花粉症測定例
EDTA採血したスギ花粉症(スギRAST：クラス4，総IgE値：130U/mL)全血に、治療用標準化スギ花粉エキスを添加して好塩基球の活性化を検出（CRTH2-FITC/CD203c-PEのドットプロット上にて、活性化好塩基球を赤でペイント）。ヒストグラム中の陽性率(%)は、全好塩基球に対する活性化好塩基球の割合。
好塩基球は末梢血中にはごく少数しか存在せず、その散乱光特性（スキャッターサイトグラム上の位置）がリンパ球や単球に近いため、CD203c-PEのみを用いたシングルカラー測定では好塩基球集団の判別が難しい場合が少なくありません。Allergenicity KitはCD203ｃにリンパ球の大部分を占めるTリンパ球のマーカーであるCD3と、好塩基球をはじめとした炎症細胞表面に発現するCRTH2（CD294）を組み合わせることで、好塩基球のより確実な同定を可能にしています。
ヘパリン血、EDTA血のどちらでも測定可能です。 好塩基球の活性化はCa2+依存性のため、一般的に好塩基球の活性化実験にはEDTA採血した血液は使用することができませんでした。Allergenicity kitではキット内にCa2+リッチの活性化バッファーを同梱しており、EDTA採血した血液でも好塩基球の活性化を検出することが可能です。このため、小児検体など採血量が少量に限られるような場合でも、一般血液検査の残検体を利用して測定可能です。
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