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■ 細胞表面マーカーのサンプル調製と染色方法

 
  I. 各種溶血手順フローチャート  
     
  2. Wash
注)いずれの抗体のタイプでも使用できます。
 
 
TQ-Prep
変法(Wash)
OptiLyse B
(Wash)
OptiLyse C
(Wash)
抗体の反応
抗体規定量

ヒト全血100μ(ミュー)L
抗体規定量

ヒト全血100μ(ミュー)L
抗体規定量

ヒト全血100μ(ミュー)L
抗体規定量

ヒト全血100μ(ミュー)L
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↓
室温30〜45分
室温30〜45分
室温30〜45分
室温30〜45分
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洗浄
PBS 2〜3mL添加400×g、5分
↓
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溶血
TQ-Prepにかける
1mL(原液を25倍希釈)
溶血剤 100μ(ミュー)L
溶血剤 500μ(ミュー)L
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30秒〜2分室温放置
10分室温放置
10分室温放置
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反応停止
フィクサティブ250μ(ミュー)L
蒸留水 1mL(10分放置)
PBS 500μ(ミュー)L(15分放置)
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PBSで洗浄
PBS 2mL
PBS 2mL
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↓
400〜450×g、5分
400〜450×g、5分
↓
↓
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↓
↓
↓
PBSで洗浄
PBS 2mL
PBS 2mL
PBS 2mL
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↓
↓
400〜450×g、5分
400〜450×g、5分
400〜450×g、5分
↓
↓
↓
再浮遊
PBS 500μ(ミュー)L
PBS 500μ(ミュー)L
PBS 500μ(ミュー)L
PBS 500μ(ミュー)L
↓
↓
↓
↓
↓
測定
2〜8℃で保存
(24時間以内)
2〜8℃で保存
(24時間以内)
2〜8℃で保存
(24時間以内)
2〜8℃で保存
(24時間以内)
(保存時間)

0.5%パラホルムアルデヒド溶液に再浮遊した場合

 
   
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