現在、保険診療として実施の可能なフローサイトメトリーが用いられる臨床検査項目を以下に示します。
| 検査項目 | 項目別点数 | その他関連 |
|---|---|---|
| フローサイトメトリー法による T細胞・B細胞百分率検査 |
210 | 免疫学的検査判断料：144 |
| モノクローナル抗体法による T細胞サブセット検査（一連につき） |
220 | 免疫学的検査判断料：144 |
| フローサイトメトリーのTwo-color分析法 による赤血球検査 |
290 | 免疫学的検査判断料：144 |
| リンパ球幼若化検査（一連につき） | 290 | 免疫学的検査判断料：144 |
| 抗血小板抗体検査 | 270 | 免疫学的検査判断料：144 |
| 顆粒球機能検査 （種目数にかかわらず一連につき） |
200 | 免疫学的検査判断料：144 |
| 表面免疫グロブリン検査 （一連につき） |
170 | 免疫学的検査判断料：144 |
| モノクローナル抗体法による 造血器悪性腫瘍細胞検査(一連につき) |
1,000 | 血液学的検査判断料：125 |
また、手術（造血幹細胞移植）の一連のプロセスとして、フローサイトメトリーを用いた検査が実施されるケースがあります。
| 手術 | 同種骨髄移植 | 57,200 | CD34陽性細胞数測定 |
|---|---|---|---|
| 自家末梢血幹細胞移植 | 30,000 | CD34陽性細胞数測定 | |
| 同種末梢血幹細胞移植 | 55,000 | CD34陽性細胞数測定 | |
| 自家造血幹細胞移植 | 25,000 | CD34陽性細胞数測定 | |
| 臍帯血移植 | 44,300 | CD34陽性細胞数測定 |
これらの中で病院の臨床検査室や臨床検査センターでよく実施されているフローサイトメトリーのアプリケーションは、以下の3種類です。
①リンパ球サブセット解析
②CD34陽性細胞数の測定
③白血病／悪性リンパ腫タイピング
いずれもHIVなどの免疫疾患や、白血病などの血液疾患の診断、移植治療で非常に重要な検査となっています。
また、これらの分析は、現在の技術ではフローサイトメトリーを用いない限り分析できないものです。
①リンパ球サブセット解析
CD抗原などの細胞表面抗原を蛍光標識したモノクローナル抗体で標識して（Ⅵ．目印の見つけ方 －モノクローナル抗体による染色― 参照）、リンパ球サブセットそれぞれの割合や、特定サブセットの細胞数の変化を調べます。
この検査で用いられる代表的なCD抗原は、CD3（T細胞）、CD4（ヘルパーT細胞）、CD8（細胞障害性T細胞）、CD19（B細胞）、CD56（NK細胞）です。これら以外の抗原を利用して詳細なサブセット解析を行うこともあります。また、細胞質内の抗原を染色することもあります。例えば、細胞内サイトカイン（アプリケーションノート参照）を染色することで、Th1（Type1ヘルパーT）細胞とTh2（Type2ヘルパーT）細胞を解析することもできます。
②CD34陽性細胞数の測定
CD34は造血幹細胞（血液学の基礎参照）が持つ代表的な細胞表面抗原です。国際細胞療法学会（ISCT）では真の造血幹細胞はCD34陽性、CD45弱陽性で、側方散乱光は中程度以下であると提唱しています。造血幹細胞の絶対数を測定することは白血病治療において非常に重要で、体重あたり2×106個/kｇの幹細胞を移植することが治療成功のために必要であるといわれています。
先に挙げた特徴を持つ細胞の絶対数を精密に測定できる技術は、モノクローナル抗体を用いたフローサイトメトリーに限られており、臨床検査における重要なアプリケーションのひとつになっています。詳しくはアプリケーションノート11を参照ください。
③白血病／悪性リンパ腫タイピング
造血幹細胞（血液学の基礎参照）は、さまざまな血液細胞（赤血球、血小板、白血球など）に分化します。白血病は、どの血液細胞が腫瘍化（がん化）したのかによって、その後の治療方針が大きく異なります。“どの細胞“といった場合、リンパ球なのか、単球なのか、Ｔ細胞なのか、Ｂ細胞なのかといった、どの系統の細胞なのかという意味と、より幼弱な細胞なのか、あるいはより成熟した細胞なのか、といった、どの成熟段階の細胞なのかという二つの意味が含まれます。
白血病タイピングはこうした二つの意味を含めて、“どんな細胞が腫瘍化しているのか“を調べる検査であるということができます。実際の検査に当たっては、リンパ球サブセット検査と同様に、さまざまな細胞表面や細胞質内に存在する抗原を蛍光標識モノクローナル抗体で染色して、対象となる白血病細胞を解析します。
| Ｔ細胞系 | CD1, CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD8, |
|---|---|
| Ｂ細胞系 | CD19, CD20, FMC7 |
| 骨髄系 | CD13, CD14, CD33, CD34, CD117 |
| その他 | CD10, CD38, CD56, HLA-DR, CD41/CD61, Glycophorin-A |
詳しくは、白血病タイピング検査概論
リンパ腫タイピングは、リンパ腫の細胞を調べることになります。ただしこの場合、リンパ節の細胞が対象になるため、あらかじめ細胞がひとつづつばらばらになった浮遊細胞に調製しておく必要があります。
詳しくは、FCMによる悪性リンパ腫の解析
精度管理
これらの検査を正確に行うためには、精度管理が重要になります。コントロール血球による内部精度管理や、施設間精度管理が行われている検査である必要があります。
フローサイトメトリーの精度管理につきましては、FCMのための精度管理入門にて、詳しく解説されています。
参考 プレゼンテーションファイル
