Annexin V (アネキシンV)

【アポトーシス検出キット】


アポトーシスの初期段階では、細胞膜の完全性は保たれていますが、膜のリン脂質の非対称性が失われます。それに伴い、細胞膜の内側に局在する陰性荷電リン脂質のフォスファチジルセリン(PS)が細胞表面に露出します。Ca2+依存性のリン脂質結合タンパクであるAnnexin VはPSに選択的に結合します。
 

アプリケーション クローン(アイソタイプ) 標識 容量 用途 製品番号 価格
C1,2
FITC Kit
Annexin V-FITC 20テスト FCM IM2375 \28,800 データシート
Annexin V-FITC 200テスト FCM IM3546 \148,000 データシート
BIOTIN Kit
Annexin V-Biotin 20テスト FCM IM2585 \24,800 データシート
Annexin V-Biotin 200テスト FCM IM2586 \138,000 データシート
C3 FITC/7-AAD Kit
FITC/7-AAD 150テスト FCM IM3614 \125,000 データシート

1- Berthou C. et al. J. Immunol., 159, 5293-5300 (1997); 2- Pepper C. et al. Leukemia Res. 22, 439-444 (1998). ;  3-Hasper H. J. et al. Cytometry, 40, 167-171 (2000)




Annexin Vキットは、標識Annexin VとPSの結合をもとに、ヨウ化プロピディウム(PI)との組み合わせでアポトーシスを検出するキットです。Annexin V FITCキットは、短時間(10分)かつ簡単な1ステップ処理でアポトーシス細胞を染色できます。細胞の固定や洗浄の操作は不要です。染色された細胞は、フローサイトメトリーや蛍光顕微鏡で分析できます。 アポトーシスの初期段階の細胞では、露出したPSに結合したアネキシンXの蛍光は観察されますが、細胞膜の構造自体は保たれているためPIには染色されません。アポトーシスの進行に伴い、細胞膜の構造が崩壊して二次的な細胞壊死(ネクローシス)の状態に至ると、アネキシンXとPIの両方の蛍光が観察されます。
PE標識抗体を用いて特定の細胞集団に限定したアポトーシスを3カラー分析で解析する場合には、PEとの蛍光コンペンセーションが容易な7-アミノアクチノマイシンD(7-AAD)を組み合せたキットが便利です。
Biotinキットは、蛍光色素や酵素等で標識したストレプトアビジン試薬と組み合わせて使用します。細胞表面抗原との2重染色の他、付着性の細胞や組織のAnnexin V染色にも応用が可能です。


アポトーシス を起こしたJurkat細胞株。 Annexin V-FITCとヨウ化プロピジウムの二重染色 (IM2375で染色)。 参考:アプリケーションノート9.アポトーシスの検出をご参照ください。


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